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豬瘟病毒熒光定量PCR檢測試劑盒

豬瘟病毒熒光定量PCR檢測試劑盒

簡要描述:豬瘟病毒熒光定量檢測試劑盒——探針法 用于定性檢測豬血液、唾液、鼻腔分泌物、糞便等樣本中的豬病病毒,該豬病以發熱、皮膚發紺、淋巴結,腎,胃腸粘膜明顯出血為特征,病情短,死亡率高。

產品型號:

所屬分類:熒光定量PCR試劑系列

更新時間:2022-04-02

廠商性質:生產廠家

詳情介紹

本試劑盒利用實時熒光PCR檢測技術,以豬病病毒基因組中的高度保守序列為靶區域,設計特異性引物和TaqMan熒光探針,通過PCR擴增實現對豬病病毒核酸的快速檢測。

【主要組成成分】

1.   試劑盒包裝組成

序號

組成

規格

用量/個反應

1

2XAvantFast Probe mix

1支,625μl/支

12.5μL

2

引物探針

1支,375μl/支

7.5μl

3

陽性對照

1支,250μl/支


4

陰性對照

1支,250μl/支


【檢驗方法】

一、 使用前準備:

1.  試劑盒中各組分充分解凍并混勻。

2.  核酸提取尤其是針對RNA時最好采用冷凍高速離心機,操作前請將溫度設定在4℃預冷。

3.  推薦使用進口離心管和帶濾芯移液器頭進行操作,檢測過程中使用不帶熒光物質一次性乳膠手套。

二、 核酸提?。ㄔ跇颖咎幚韰^進行):

1.  按照試劑說明書操作

三、 PCR擴增檢測:

1.  配液(在試劑準備區進行):取出擴增反應液,室溫融化后充分混勻,短暫離心,并按反應個數分別取反應液和酶按照以下配比配制反應液:(注意應考慮有陽性對照和陰性對照甚至空白對照)

試劑

2XAvantFast Probe mix

引物探針

用量(反應個數為n)

12.5μl×n

7.5μl×n

反應液配制時應充分混勻,短暫離心,按20μl/管分裝到PCR反應管中,轉移至樣本處理區;

2.  加樣(在樣本處理區進行):分別加入5μl步驟二中處理好的樣本、陰性對照、陽性對照,蓋好管蓋,轉移至核酸擴增區;

3.  PCR擴增檢測(在核酸擴增區進行):

將反應管置于全自動熒光定量PCR儀樣品槽中,熒光通道選Hex,設置擴增反應條件為:

階段

溫度時間循環次數
預變性
95℃2min1
變性95℃10s40
退火和延伸60℃30s





*如果使用ABI系列熒光PCR儀,設置擴增體積為25μl,同時要選擇passive referencequenchernone的模式。









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